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實驗案例
首頁 實驗案例 冷凍研磨儀在稻谷DNA提取中的應用:解決樣品研磨難題
2026/6/15 14:19:24
冷凍研磨儀在稻谷DNA提取中的應用:解決樣品研磨難題
來源:上海凈信

在植物研究中,水稻基因組測序、分子標記育種、轉基因檢測……這些操作都是需要先把稻谷磨碎,提取DNA。稻谷外殼堅硬、淀粉含量高。手工液氮研磨耗時費力,批次間也難以統一。但這些統統都不是難題,上海凈信冷凍研磨儀給出了一套有關于稻谷研磨DNA提取的穩定解決方案。

冷凍研磨儀的核心原理

稻谷是由稃殼、種皮和胚乳三層結構組成。稃殼含硅質和木質素,質地堅硬;胚乳淀粉顆粒多,遇水發粘。樣品研磨不充分,細胞壁沒破,DNA釋放量直接打折。

1. 低溫鎖活:均勻粉末接入CTAB/SDS裂解液,細胞DNA充分溶出,得率穩定

2. 高頻沖擊:高速三維振蕩,研磨珠高速撞擊,稃殼和胚乳在幾十秒內碎成細粉

3. 釋放完整:均勻粉末接入CTAB/SDS裂解液,細胞DNA充分溶出,得率穩定

4. 高通量并行處理:單次可運行數十個樣品,適配2mL~50mL研磨罐。育種篩選上百份材料時,一臺設備幾輪就能跑完,大幅壓縮前處理周期

5. 三維復合運動:三維運動,頻率可達70Hz,配合氧化鋯或不銹鋼研磨珠,稃殼硬質結構快速破碎,粒度均勻一致

6. 封閉式無交叉污染:每個樣品獨立密封于研磨罐,罐體不銹鋼內腔可滅菌。批次間清理方便,不給交叉污染留空間

稻谷研磨DNA提取的標準實驗流程

1. 研磨步驟:準備一臺冷凍研磨儀JXFSTPRP-CLN、2mL×24適配器一套、2mL研磨管、3mm/5mm研磨珠、樣品

2. 將樣品放入研磨管中,放入鋼珠,樣品加研磨珠不超過研磨管三分之二。分4個對照組:

(1)8顆稻谷、2顆5mm鋼珠,4顆3mm鋼珠

(2)2顆稻谷、2顆5mm鋼珠

(3)2顆稻谷、2顆5mm鋼珠,4顆3mm鋼珠

(4)8顆稻谷、2顆5mm鋼珠

3. 將裝好樣品的研磨管放入適配器中

4. 將適配器放入研磨儀的軸上,并固定好

5. 設置參數:研磨時間30S,間歇10S,次數2次,功率60Hz

6.研磨結束后,取出樣品。可以看出樣品3效果最好

稻谷樣品研磨后實驗效果圖

附四組對照研磨效果圖

冷凍研磨儀對稻谷樣品研磨的實驗注意事項

1. 樣品放入研磨管前,選擇合適的研磨管

2. 堅硬、有韌性的樣品,可以將加入樣品的適配器放入液氮提前預冷

3. 研磨管放入的樣本+研磨珠不超過三分之二

冷凍研磨儀設備的實驗應用領域

1. 分子標記育種:大批量單粒種子DNA提取,用于SSR/SNP標記檢測。研磨均勻、得率穩定,直接決定下游PCR結果的可靠性。

2. 轉基因成分篩查:進出口稻谷及制品的轉基因檢測,要求從種皮到胚乳充分破壁。冷凍研磨確保不同批次間的提取效率可重復。

3. 代謝物分析:種子中的黃酮、酚酸等次生代謝物對溫度高度敏感。液氮冷凍研磨可保留95%以上活性組分,為后續LC-MS/MS分析提供可靠前處理。

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